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            人血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1)ELISA試劑盒

            時間:2022-03-10 15:12:48      
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            品收集、處理及保存方法

            1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

            2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

            3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

            4.  組織勻漿:將組織a加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

            5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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            自備物品

            1. 酶標儀(450nm)

            2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

            3. 37℃恒溫箱


            操作注意事項

            1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。

            2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

            3.  濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,最終結果乘以5才是樣本實際濃度。

            4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

            5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

             

            試劑盒組成

            名稱

            96孔配置

            48孔配置

            備注

            微孔酶標板

            12孔×8條

            12孔×4條

            標準品

            0.3mL*6管

            0.3mL*6管

            樣本稀釋液

            6mL

            3mL

            檢測抗體-HRP

            10mL

            5mL

            20×洗滌緩沖液

            25mL

            15mL

            按說明書進行稀釋

            底物A

            6mL

            3mL

            底物B

            6mL

            3mL

            終止液

            6mL

            3mL

            封板膜

            2張

            2張

            說明書

            1份

            1份

            自封袋

            1個

            1個

             

            洗板方法

            1.  手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

            2.  自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

             

            操作步驟

            1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

            2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

            3.  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

            4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

            5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

            6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

            7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

             

            免責聲明

            1.   試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。

            2.   嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。

             

            上海舒話生物是一家集科研、生產、銷售為一體的生物,以科研試劑生產、診斷試劑原料供應產品生產為核心,致力于為全球來自高等院校、政府研究機構、診斷試劑生產廠家以及生物公司的廣大客戶們提供高質量生物產品,產品擁有質量保證,有問題免費包換,還可以免費代測,想進一步了解我們的產品歡迎您前來詳詢。



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