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            羊(Sheep)包蟲病抗體(Hydatidosis Ab) ELISA檢測試劑盒

            時間:2022-01-27 16:28:21      
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            檢測原理

            試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被包蟲病抗原的微孔中,依次加入標本、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中包蟲病抗體(Hydatidosis Ab)的存在與否。

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            試劑盒組成

            名稱

            96孔配置

            48孔配置

            備注

            微孔酶標板

            12孔×8條

            12孔×4條

            陰性對照

            0.5mL

            0.5mL

            陽性對照

            0.5mL

            0.5mL

            檢測抗體-HRP

            10mL

            5mL

            20×洗滌緩沖液

            25mL

            15mL

            按說明書進行稀釋

            底物A

            6mL

            3mL

            底物B

            6mL

            3mL

            終止液

            12mL

            6mL

            封板膜

            2張

            2張

            說明書

            1份

            1份

            自封袋

            1個

            1個


            操作步驟

            1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

            2.  設置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL;

            3.  待測樣本孔加待測樣本50μL;

            4.  隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

            5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

            6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

            7.  每孔加入終止液100μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。


            結果判斷

             1.  試驗有效性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;

                            陰性對照孔OD值平均值≤0.15。

            2.  臨界值(Cut off)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

            3.  陰性判斷:樣品OD值<臨界值(Cut off),樣品為陰性

            4.  陽性判斷:樣品OD值>臨界值(Cut off),樣品為陽性


            試劑盒性能

            1.  準確性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;陰性對照孔OD值平均值≤0.15,說明試驗結果有效。

            2.  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

            3.  重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

            4.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

            5.  有效期:6個月


            上海舒話生物是一家集科研、生產、銷售為一體的生物,以科研試劑生產、診斷試劑原料供應產品生產為核心,致力于為全球來自高等院校、政府研究機構、診斷試劑生產廠家以及生物公司的廣大客戶們提供高質量生物產品,產品擁有質量保證,有問題免費包換,還可以免費代測,想進一步了解我們的產品歡迎您前來詳詢。


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